Universal SYBR GREEN qPCR Premix (Blue)

Saukewa: HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) shine riga-kafi don haɓaka ƙimar PCR na 2 × na gaske wanda ke da girman hankali da ƙayyadaddun ƙayyadaddun, shuɗi ne cikin launi, kuma yana da tasirin binciken ƙari na samfurin.Babban bangaren Taq DNA polymerase yana amfani da farawar zafi na antibody don hana haɓakawa da ba takamammen yadda ya kamata ba saboda bacin rai yayin shirye-shiryen samfurin.A lokaci guda kuma, dabarar tana ƙara abubuwan haɓakawa don haɓaka haɓaka haɓakar haɓakar halayen PCR da daidaita haɓakar kwayoyin halitta tare da abubuwan GC daban-daban (30 ~ 70%), ta yadda PCR mai ƙididdigewa na iya samun kyakkyawar alaƙar madaidaiciya a cikin adadi mai yawa. yanki.Wannan samfurin ya ƙunshi na musamman na ROX Passive Reference Dye, wanda ya dace da yawancin kayan aikin qPCR.Ba lallai ba ne don daidaita ƙaddamarwar ROX akan kayan aiki daban-daban.Ya zama dole kawai don ƙara firamare da samfura don shirya tsarin amsawa don haɓakawa.

Abubuwan da aka gyara

Universal Blue qPCR Master Mix

Yanayin ajiya

Ana jigilar samfurin tare da fakitin kankara kuma ana iya adana shi a -25 ℃ ~ -15 ℃ na watanni 18.Wajibi ne don kauce wa hasken haske mai ƙarfi lokacin adanawa ko shirya tsarin amsawa.

Ƙayyadaddun bayanai

Umarni

1.Reaction System

[Lura]: Mix sosai kafin amfani don guje wa kumfa mai yawa daga girgiza mai ƙarfi.

a) Ƙaddamarwa na farko: Ƙarƙashin ƙaddamarwa na ƙarshe shine 0.2μmol / L, kuma ana iya daidaita shi tsakanin 0.1 da 1.0μmol / L kamar yadda ya dace.

b) Matsakaicin samfuri: Idan samfurin samfurin cDNA ba shi da diluted, ƙimar da aka yi amfani da ita bai kamata ya wuce 1/10 na jimlar ƙarar qPCR ba.

c) Tsarin samfuri: Ana ba da shawarar a tsoma maganin hannun jari na cDNA da sau 5-10.Mafi kyawun adadin samfuri da aka ƙara shine mafi kyau lokacin da ƙimar Ct da aka samu ta haɓakawa shine hawan keke 20-30.

d) Tsarin amsawa: Ana ba da shawarar yin amfani da 20μL ko 50μL don tabbatar da tasiri da maimaita ƙarfin haɓakar ƙwayoyin cuta.

e) Shirye-shiryen tsarin: Da fatan za a shirya a cikin babban benci mai tsabta kuma yi amfani da tukwici da bututun amsawa ba tare da ragowar nuclease ba;ana ba da shawarar yin amfani da tukwici tare da harsashi masu tacewa.Guji gurbacewar giciye da gurɓataccen iska.

2.Shirin maida martani

Daidaitaccen Shirin

Shirin gaggawa

[Lura]: Shirin mai sauri ya dace da mafi yawan kwayoyin halitta, kuma ana iya gwada daidaitattun shirye-shirye don kowane hadadden tsarin kwayoyin halitta.

a) Yanayin zafi da lokaci: Da fatan za a daidaita daidai da tsayin firam da jigon manufa.

b) Samun siginar Fluorescence (★): Da fatan za a saita tsarin gwaji bisa ga buƙatun a cikin umarnin don amfani da kayan aiki.

c) Narkewar lanƙwasa: Za a iya amfani da tsarin tsoho na kayan aiki akai-akai.

3. Binciken Sakamako 

Ana buƙatar mafi ƙarancin kwafin halittu guda uku don gwaje-gwajen ƙididdiga.Bayan abin da ya faru, ana buƙatar tabbatar da lanƙwan ƙarawa da narkewar.

3.1 Lanƙwan ƙarawa:

Madaidaicin lanƙwan ƙara girman S-dimbin yawa.Binciken ƙididdiga ya fi daidai lokacin da ƙimar Ct ta faɗi tsakanin 20 da 30. Idan ƙimar Ct ta ƙasa da 10, wajibi ne a tsarma samfurin kuma sake yin gwajin.Lokacin da darajar Ct ta kasance tsakanin 30-35, yana da mahimmanci don ƙara haɓaka samfurin samfuri ko ƙarar tsarin amsawa, don inganta haɓakar haɓakawa da tabbatar da daidaiton sakamakon bincike.Lokacin da ƙimar Ct ta fi 35, sakamakon gwajin ba zai iya yin ƙididdige yawan adadin maganganun kwayoyin halitta ba, amma ana iya amfani da shi don ƙididdigar ƙima.

3.2 Lankwalin narkewa:

Ɗayan kololuwar ƙwayar narkewa yana nuna cewa ƙayyadaddun halayen halayen yana da kyau kuma ana iya yin nazarin ƙididdiga;idan yanayin narkewa ya nuna kololuwa biyu ko yawa, ba za a iya yin nazarin ƙididdiga ba.Tsarin narkewa yana nuna kololuwa biyu, kuma ya zama dole a yi hukunci ko kololuwar da ba ta da niyya ba ta zama firam dimer ko haɓaka ta musamman ta DNA agarose gel electrophoresis.Idan dimer ne mai mahimmanci, ana bada shawara don rage ƙaddamarwar ƙaddamarwa ko sake tsara abubuwan da aka tsara tare da ingantaccen haɓakawa.Idan ba ƙayyadadden haɓakawa ba ne, da fatan za a ƙara yawan zafin jiki mai ɓarna, ko sake fasalta abubuwan da ke gaba da ƙayyadaddun bayanai.

Bayanan kula

Da fatan za a saka PPE da ake buƙata, irin wannan rigar lab da safar hannu, don tabbatar da lafiyar ku da amincin ku!

Wannan samfurin don amfanin bincike ne kawai!